वयस्क मच्छरों पर आवश्यक तेलों का सहक्रियात्मक प्रभाव एडीस एजिप्टी मच्छर (डिप्टेरा: कुलिसिडे) के विरुद्ध परमेथ्रिन की विषाक्तता को बढ़ाता है।

थाईलैंड में मच्छरों के लिए स्थानीय खाद्य प्रसंस्करण संयंत्रों का परीक्षण करने वाली पिछली परियोजना में, साइपरस रोटंडस, गलांगाल और दालचीनी के आवश्यक तेलों (ईओ) में एडीज एजिप्टी मच्छरों के खिलाफ अच्छी मच्छर-रोधी गतिविधि पाई गई। पारंपरिक खाद्य प्रसंस्करण संयंत्रों के उपयोग को कम करने के प्रयास में,कीटनाशकोंप्रतिरोधी मच्छर आबादी के नियंत्रण में सुधार करने के उद्देश्य से, इस अध्ययन का लक्ष्य एडीज मच्छरों (एजिप्टी) पर एथिलीन ऑक्साइड के वयस्कनाशक प्रभावों और परमेथ्रिन की विषाक्तता के बीच संभावित तालमेल की पहचान करना था, जिसमें पाइरेथ्रॉइड-प्रतिरोधी और संवेदनशील स्ट्रेन भी शामिल हैं।
C. rotundus और A. galanga के प्रकंदों तथा C. verum की छाल से निकाले गए एसेंशियल ऑयल (EO) की रासायनिक संरचना और संवेदनशील स्ट्रेन मुआंग चियांग माई (MCM-S) और प्रतिरोधी स्ट्रेन पांग माई डांग (PMD-R) के विरुद्ध इसकी जीवाणुनाशक गतिविधि का मूल्यांकन करना। ) वयस्क सक्रिय एडीस एजिप्टी मच्छरों पर एसेंशियल ऑयल-परमेथ्रिन मिश्रण का एक वयस्क जैव परीक्षण भी किया गया ताकि इसकी सहक्रियात्मक गतिविधि को समझा जा सके।
GC-MS विश्लेषण विधि का उपयोग करके किए गए रासायनिक लक्षण वर्णन से पता चला कि C. rotundus, A. galanga और C. verum के एसेंशियल ऑयल से 48 यौगिकों की पहचान की गई, जो कुल घटकों का क्रमशः 80.22%, 86.75% और 97.24% हैं। साइपरस तेल, गैलंगल तेल और बाल्समिक तेल के मुख्य घटक क्रमशः साइपेरीन (14.04%), β-बिसबोलीन (18.27%) और सिनामाल्डिहाइड (64.66%) हैं। जैविक वयस्क हत्या परीक्षणों में, C. rotundus, A. galanga और C. verum के ईवी ए. को मारने में प्रभावी थे। एडीस एडीस के लिए, एमसीएम-एस और पीएमडी-आर के एलडी50 मान क्रमशः 10.05 और 9.57 μg/mg मादा, 7.97 और 7.94 μg/mg मादा, और 3.30 और 3.22 μg/mg मादा थे। इन एसेंशियल ऑयल्स में वयस्क एडीस एडीस को मारने में एमसीएम-एस और पीएमडी-आर की दक्षता पाइपरॉनिल ब्यूटोक्साइड (पीबीओ मान, एलडी50 = क्रमशः 6.30 और 4.79 μg/mg मादा) के लगभग बराबर थी, लेकिन परमेथ्रिन (एलडी50 मान = क्रमशः 0.44 और 3.70 एनजी/mg मादा) जितनी प्रभावी नहीं थी। हालांकि, संयुक्त जैव परीक्षणों में एसेंशियल ऑयल और परमेथ्रिन के बीच तालमेल पाया गया। एडीस मच्छरों के दो उपभेदों के खिलाफ परमेथ्रिन के साथ महत्वपूर्ण तालमेल देखा गया। एडीस एजिप्टी मच्छर को सी. रोटंडस और ए. गैलंगा के ईएम में देखा गया। सी. रोटंडस और ए. गैलंगा के तेलों को मिलाने से एमसीएम-एस पर परमेथ्रिन के एलडी50 मान में उल्लेखनीय कमी आई, जो मादाओं में क्रमशः 0.44 से घटकर 0.07 एनजी/एमजी और 0.11 एनजी/एमजी हो गए, और सहक्रिया अनुपात (एसआर) मान क्रमशः 6.28 और 4.00 रहे। इसके अतिरिक्त, सी. रोटंडस और ए. गैलंगा के एसेंशियल ऑयल्स ने भी पीएमडी-आर पर परमेथ्रिन के एलडी50 मान में उल्लेखनीय कमी की, जो मादाओं में क्रमशः 3.70 से घटकर 0.42 एनजी/एमजी और 0.003 एनजी/एमजी हो गए, और एसआर मान क्रमशः 8.81 और 1233.33 रहे।
एडीज मच्छरों की दो प्रजातियों के खिलाफ वयस्क विषैलेपन को बढ़ाने के लिए ईथाइलीन ऑक्साइड-परमेथ्रिन संयोजन का सहक्रियात्मक प्रभाव। एडीज एजिप्टी मच्छरों पर एथिलीन ऑक्साइड की भूमिका मच्छर-रोधी प्रभावकारिता को बढ़ाने में आशाजनक है, विशेष रूप से उन मामलों में जहां पारंपरिक यौगिक अप्रभावी या अनुपयुक्त होते हैं।
एडीस एजिप्टी मच्छर (डिप्टेरा: कुलिसिडे) डेंगू बुखार और अन्य संक्रामक वायरल रोगों जैसे पीत ज्वर, चिकनगुनिया और जीका वायरस का मुख्य वाहक है, जो मनुष्यों के लिए एक बड़ा और लगातार खतरा पैदा करता है [1, 2]। डेंगू वायरस मनुष्यों को प्रभावित करने वाला सबसे गंभीर रोगजनक रक्तस्रावी बुखार है, जिसके अनुमानित 5-10 करोड़ मामले प्रतिवर्ष होते हैं और विश्व स्तर पर 2.5 अरब से अधिक लोग इसके जोखिम में हैं [3]। इस संक्रामक रोग के प्रकोप से अधिकांश उष्णकटिबंधीय देशों की आबादी, स्वास्थ्य प्रणालियों और अर्थव्यवस्थाओं पर भारी बोझ पड़ता है [1]। थाई स्वास्थ्य मंत्रालय के अनुसार, 2015 में देशभर में डेंगू बुखार के 142,925 मामले और 141 मौतें दर्ज की गईं, जो 2014 की तुलना में तीन गुना से अधिक थीं [4]। ऐतिहासिक साक्ष्यों के बावजूद, एडीस मच्छर द्वारा डेंगू बुखार को या तो पूरी तरह से समाप्त कर दिया गया है या काफी हद तक कम कर दिया गया है। एडीस एजिप्टी मच्छर [5] पर नियंत्रण के बाद, संक्रमण दर में नाटकीय रूप से वृद्धि हुई और यह बीमारी दुनिया भर में फैल गई, जिसका एक कारण दशकों से जारी वैश्विक तापवृद्धि भी है। एडीस एजिप्टी मच्छर का उन्मूलन और नियंत्रण अपेक्षाकृत कठिन है क्योंकि यह एक घरेलू मच्छर वाहक है जो दिन के दौरान मानव बस्तियों के अंदर और आसपास प्रजनन करता है, भोजन करता है, आराम करता है और अंडे देता है। इसके अलावा, यह मच्छर प्राकृतिक घटनाओं (जैसे सूखा) या मानव नियंत्रण उपायों के कारण होने वाले पर्यावरणीय परिवर्तनों या गड़बड़ियों के अनुकूल ढलने की क्षमता रखता है और अपनी मूल संख्या तक वापस पहुँच सकता है [6, 7]। चूंकि डेंगू बुखार के टीके हाल ही में स्वीकृत हुए हैं और डेंगू बुखार का कोई विशिष्ट उपचार नहीं है, इसलिए डेंगू के संचरण के जोखिम को रोकना और कम करना पूरी तरह से मच्छर वाहकों को नियंत्रित करने और मानव संपर्क को समाप्त करने पर निर्भर करता है।
विशेष रूप से, मच्छरों के नियंत्रण के लिए रसायनों का उपयोग अब व्यापक एकीकृत वेक्टर प्रबंधन के एक महत्वपूर्ण घटक के रूप में सार्वजनिक स्वास्थ्य में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। सबसे लोकप्रिय रासायनिक विधियों में मच्छर के लार्वा (लार्विसाइड) और वयस्क मच्छरों (एडिडोसाइड) के खिलाफ काम करने वाले कम विषैले कीटनाशकों का उपयोग शामिल है। स्रोत में कमी और ऑर्गेनोफॉस्फेट और कीट वृद्धि नियामकों जैसे रासायनिक लार्विसाइड के नियमित उपयोग के माध्यम से लार्वा नियंत्रण को महत्वपूर्ण माना जाता है। हालांकि, सिंथेटिक कीटनाशकों से जुड़े प्रतिकूल पर्यावरणीय प्रभाव और उनके श्रम-गहन और जटिल रखरखाव एक प्रमुख चिंता का विषय बने हुए हैं [8, 9]। पारंपरिक सक्रिय वेक्टर नियंत्रण, जैसे कि वयस्क नियंत्रण, वायरल प्रकोपों ​​के दौरान नियंत्रण का सबसे प्रभावी साधन बना हुआ है क्योंकि यह संक्रामक रोग वाहकों को जल्दी और बड़े पैमाने पर समाप्त कर सकता है, साथ ही स्थानीय वेक्टर आबादी के जीवनकाल और दीर्घायु को कम कर सकता है [3, 10]। रासायनिक कीटनाशकों के चार वर्ग: ऑर्गेनोक्लोरीन (जिन्हें केवल डीडीटी के रूप में जाना जाता है), ऑर्गेनोफॉस्फेट, कार्बामाइट और पाइरेथ्रॉइड, वेक्टर नियंत्रण कार्यक्रमों का आधार बनते हैं, जिनमें पाइरेथ्रॉइड को सबसे सफल वर्ग माना जाता है। ये विभिन्न आर्थ्रोपोड्स के खिलाफ अत्यधिक प्रभावी होते हैं और स्तनधारियों के लिए कम विषैले होते हैं। वर्तमान में, सिंथेटिक पाइरेथ्रॉइड व्यावसायिक कीटनाशकों का अधिकांश हिस्सा हैं, जो वैश्विक कीटनाशक बाजार का लगभग 25% हिस्सा हैं [11, 12]। परमेथ्रिन और डेल्टामेथ्रिन व्यापक-स्पेक्ट्रम पाइरेथ्रॉइड कीटनाशक हैं जिनका उपयोग दशकों से दुनिया भर में कृषि और चिकित्सा महत्व के विभिन्न कीटों को नियंत्रित करने के लिए किया जाता रहा है [13, 14]। 1950 के दशक में, थाईलैंड के राष्ट्रीय सार्वजनिक स्वास्थ्य मच्छर नियंत्रण कार्यक्रम के लिए डीडीटी को पसंदीदा रसायन के रूप में चुना गया था। मलेरिया प्रभावित क्षेत्रों में डीडीटी के व्यापक उपयोग के बाद, थाईलैंड ने 1995 और 2000 के बीच धीरे-धीरे डीडीटी का उपयोग बंद कर दिया और इसके स्थान पर दो पाइरेथ्रोइड्स: परमेथ्रिन और डेल्टामेथ्रिन का प्रयोग शुरू किया [15, 16]। इन पाइरेथ्रोइड कीटनाशकों को 1990 के दशक की शुरुआत में मलेरिया और डेंगू बुखार को नियंत्रित करने के लिए मुख्य रूप से मच्छरदानी के उपयोग, थर्मल फॉग और अति-विषाक्तता वाले स्प्रे के माध्यम से पेश किया गया था [14, 17]। हालांकि, मच्छरों के मजबूत प्रतिरोध और सार्वजनिक स्वास्थ्य और सिंथेटिक रसायनों के पर्यावरणीय प्रभाव के बारे में चिंताओं के कारण जनता के अनुपालन की कमी के कारण इनकी प्रभावशीलता कम हो गई है। यह खतरे के वाहक नियंत्रण कार्यक्रमों की सफलता के लिए महत्वपूर्ण चुनौतियां पेश करता है [14, 18, 19]। रणनीति को अधिक प्रभावी बनाने के लिए, समय पर और उचित प्रतिउपाय आवश्यक हैं। अनुशंसित प्रबंधन प्रक्रियाओं में प्राकृतिक पदार्थों का प्रतिस्थापन, विभिन्न वर्गों के रसायनों का रोटेशन, सहक्रियात्मक पदार्थों का जोड़, और रसायनों का मिश्रण या विभिन्न वर्गों के रसायनों का एक साथ अनुप्रयोग शामिल हैं [14, 20, 21]। इसलिए, पर्यावरण के अनुकूल, सुविधाजनक और प्रभावी विकल्प और सहक्रियात्मक समाधान खोजने और विकसित करने की तत्काल आवश्यकता है, और इस अध्ययन का उद्देश्य इसी आवश्यकता को पूरा करना है।
प्राकृतिक रूप से प्राप्त कीटनाशक, विशेष रूप से पौधों के घटकों पर आधारित, वर्तमान और भविष्य के मच्छर नियंत्रण विकल्पों के मूल्यांकन में क्षमता प्रदर्शित करते हैं [22, 23, 24]। कई अध्ययनों से पता चला है कि पौधों के उत्पादों, विशेष रूप से आवश्यक तेलों (ईओ) का उपयोग करके महत्वपूर्ण मच्छर वाहकों को नियंत्रित करना संभव है, जो वयस्क मच्छरों को मारते हैं। अजवाइन, जीरा, ज़ेडोआरिया, सौंफ, पाइप पेपर, थाइम, शिनस टेरेबिंथिफोलिया, सिम्बोपोगोन सिट्रेटस, सिम्बोपोगोन शोएन्थस, सिम्बोपोगोन गिगेंटियस, चेनोपोडियम एम्ब्रोसियोइड्स, कोक्लोस्पर्मम प्लानचोनी, यूकेलिप्टस टेरेटिकॉर्निस, यूकेलिप्टस सिट्रियोडोरा, कैनांगा ओडोराटा और पेट्रोसेलिनम क्रिस्कम जैसे कई वनस्पति तेलों में कुछ महत्वपूर्ण मच्छर प्रजातियों के खिलाफ वयस्कनाशक गुण पाए गए हैं [25,26,27,28,29,30]। एथिलीन ऑक्साइड का उपयोग अब न केवल अकेले किया जाता है, बल्कि पादप पदार्थों के अर्क या मौजूदा सिंथेटिक कीटनाशकों के साथ मिलाकर भी किया जाता है, जिससे विषाक्तता के विभिन्न स्तर उत्पन्न होते हैं। ऑर्गेनोफॉस्फेट, कार्बामाइट और पाइरेथ्रोइड जैसे पारंपरिक कीटनाशकों का एथिलीन ऑक्साइड/पादप अर्क के साथ संयोजन विषाक्त प्रभावों में सहक्रियात्मक या प्रतिपक्षी रूप से कार्य करता है और रोग वाहकों और कीटों के विरुद्ध प्रभावी सिद्ध हुआ है [31,32,33,34,35]। हालांकि, सिंथेटिक रसायनों के साथ या उनके बिना पादप रसायनों के संयोजन के सहक्रियात्मक विषाक्त प्रभावों पर अधिकांश अध्ययन चिकित्सकीय रूप से महत्वपूर्ण मच्छरों के बजाय कृषि कीट वाहकों और कीटों पर किए गए हैं। इसके अलावा, मच्छर वाहकों के विरुद्ध पादप-सिंथेटिक कीटनाशक संयोजनों के सहक्रियात्मक प्रभावों पर अधिकांश कार्य लार्वानाशक प्रभाव पर केंद्रित रहा है।
थाईलैंड में स्वदेशी खाद्य पौधों से प्राप्त कीटनाशकों की जांच करने वाली एक चल रही शोध परियोजना के हिस्से के रूप में लेखकों द्वारा किए गए पिछले अध्ययन में, साइपरस रोटंडस, गलांगाल और दालचीनी से प्राप्त एथिलीन ऑक्साइड में वयस्क एडीज मच्छरों के खिलाफ संभावित गतिविधि पाई गई थी। [36]। इसलिए, इस अध्ययन का उद्देश्य इन औषधीय पौधों से पृथक किए गए एसेंशियल ऑयल्स की एडीज मच्छरों, जिनमें पाइरेथ्रॉइड-प्रतिरोधी और संवेदनशील स्ट्रेन शामिल हैं, के खिलाफ प्रभावशीलता का मूल्यांकन करना था। वयस्कों में अच्छी प्रभावकारिता के साथ एथिलीन ऑक्साइड और सिंथेटिक पाइरेथ्रॉइड के द्विआधारी मिश्रणों के सहक्रियात्मक प्रभाव का भी विश्लेषण किया गया है ताकि पारंपरिक कीटनाशकों के उपयोग को कम किया जा सके और मच्छर वाहकों, विशेष रूप से एडीज मच्छरों के खिलाफ प्रतिरोधक क्षमता को बढ़ाया जा सके। यह लेख प्रभावी एसेंशियल ऑयल्स के रासायनिक लक्षण वर्णन और पाइरेथ्रॉइड-संवेदनशील स्ट्रेन (MCM-S) और प्रतिरोधी स्ट्रेन (PMD-R) में एडीज मच्छरों के खिलाफ सिंथेटिक परमेथ्रिन की विषाक्तता को बढ़ाने की उनकी क्षमता की रिपोर्ट करता है।
आवश्यक तेल निष्कर्षण के लिए उपयोग किए जाने वाले सी. रोटंडस और ए. गैलंगा के प्रकंद और सी. वेरम की छाल (चित्र 1) को थाईलैंड के चियांग माई प्रांत में हर्बल दवा विक्रेताओं से खरीदा गया था। इन पौधों की वैज्ञानिक पहचान चियांग माई विश्वविद्यालय (सीएमयू), चियांग माई प्रांत, थाईलैंड के विज्ञान महाविद्यालय के जीवविज्ञान विभाग के हर्बेरियम वनस्पति विज्ञानी श्री जेम्स फ्रैंकलिन मैक्सवेल और कार्नेगी मेलन विश्वविद्यालय के फार्मेसी महाविद्यालय के फार्मेसी विभाग की वैज्ञानिक वन्नारी चारोएनसैप के परामर्श से की गई थी। प्रत्येक पौधे के वाउचर नमूने भविष्य में उपयोग के लिए कार्नेगी मेलन विश्वविद्यालय स्कूल ऑफ मेडिसिन के परजीवी विज्ञान विभाग में संग्रहीत हैं।
प्राकृतिक एसेंशियल ऑयल (EOs) निकालने से पहले, पौधों के नमूनों को अलग-अलग 3-5 दिनों तक खुली जगह में, जहाँ हवा का अच्छा वेंटिलेशन हो और आसपास का तापमान लगभग 30 ± 5 डिग्री सेल्सियस हो, छाया में सुखाया गया ताकि उनमें से नमी निकल जाए। प्रत्येक सूखे पौधे की सामग्री के कुल 250 ग्राम को मशीन से पीसकर दरदरा पाउडर बनाया गया और भाप आसवन द्वारा एसेंशियल ऑयल (EOs) को अलग किया गया। आसवन उपकरण में एक इलेक्ट्रिक हीटिंग मेंटल, 3000 मिलीलीटर का गोल पेंदे वाला फ्लास्क, एक एक्सट्रैक्शन कॉलम, एक कंडेंसर और एक कूल ऐस डिवाइस (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan) शामिल थे। फ्लास्क में 1600 मिलीलीटर आसुत जल और 10-15 कांच के मोती डालें और फिर इसे इलेक्ट्रिक हीटर से लगभग 100 डिग्री सेल्सियस तक कम से कम 3 घंटे तक गर्म करें जब तक कि आसवन पूरा न हो जाए और एसेंशियल ऑयल का उत्पादन बंद न हो जाए। ईओ परत को पृथक्करण फ़नल का उपयोग करके जलीय चरण से अलग किया गया, निर्जल सोडियम सल्फेट (Na2SO4) पर सुखाया गया और रासायनिक संरचना और वयस्क गतिविधि की जांच होने तक 4 डिग्री सेल्सियस पर एक सीलबंद भूरी बोतल में संग्रहित किया गया।
वयस्क पदार्थ के जैव परीक्षण के साथ-साथ आवश्यक तेलों की रासायनिक संरचना का विश्लेषण किया गया। गुणात्मक विश्लेषण के लिए एक GC-MS प्रणाली का उपयोग किया गया, जिसमें हेवलेट-पैकार्ड (विलमिंगटन, कैलिफोर्निया, यूएसए) 7890A गैस क्रोमेटोग्राफ, सिंगल क्वाड्रुपोल मास सेलेक्टिव डिटेक्टर (एजिलेंट टेक्नोलॉजीज, विलमिंगटन, कैलिफोर्निया, यूएसए) और एक MSD 5975C (EI) (एजिलेंट टेक्नोलॉजीज) शामिल थे।
क्रोमैटोग्राफिक कॉलम – DB-5MS (30 मीटर × आंतरिक व्यास 0.25 मिमी × फिल्म की मोटाई 0.25 µm)। कुल GC-MS रन टाइम 20 मिनट था। विश्लेषण की शर्तें इस प्रकार हैं: इंजेक्टर और ट्रांसफर लाइन का तापमान क्रमशः 250 और 280 °C है; फर्नेस का तापमान 50°C से 250°C तक 10°C/मिनट की दर से बढ़ता है; वाहक गैस हीलियम है; प्रवाह दर 1.0 मिली/मिनट है; इंजेक्शन की मात्रा 0.2 µL (CH2Cl2 में आयतन के अनुसार 1/10%, विभाजन अनुपात 100:1) है; GC-MS डिटेक्शन के लिए 70 eV की आयनीकरण ऊर्जा वाले इलेक्ट्रॉन आयनीकरण सिस्टम का उपयोग किया जाता है। अधिग्रहण रेंज 50–550 परमाणु द्रव्यमान इकाई (amu) है और स्कैनिंग गति 2.91 स्कैन प्रति सेकंड है। घटकों के सापेक्ष प्रतिशत को शिखर क्षेत्रफल द्वारा सामान्यीकृत प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया जाता है। EO अवयवों की पहचान उनके प्रतिधारण सूचकांक (RI) पर आधारित है। RI की गणना वैन डेन डूल और क्रैट्ज़ [37] के समीकरण का उपयोग करके n-एल्केन्स श्रृंखला (C8-C40) के लिए की गई थी और इसकी तुलना साहित्य [38] और पुस्तकालय डेटाबेस (NIST 2008 और Wiley 8NO8) से प्राप्त प्रतिधारण सूचकांकों से की गई थी। दिखाए गए यौगिकों की पहचान, जैसे कि संरचना और आणविक सूत्र, उपलब्ध प्रामाणिक नमूनों के साथ तुलना करके पुष्टि की गई थी।
सिंथेटिक परमेथ्रिन और पाइपरॉनिल ब्यूटोक्साइड (पीबीओ, सहक्रियात्मक अध्ययनों में सकारात्मक नियंत्रण) के विश्लेषणात्मक मानक सिग्मा-एल्ड्रिच (सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) से खरीदे गए थे। विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) के वयस्क परीक्षण किट और परमेथ्रिन-युक्त कागज (0.75%) की नैदानिक ​​खुराकें पेनांग, मलेशिया में स्थित डब्ल्यूएचओ वेक्टर कंट्रोल सेंटर से व्यावसायिक रूप से खरीदी गईं। उपयोग किए गए अन्य सभी रसायन और अभिकर्मक विश्लेषणात्मक श्रेणी के थे और इन्हें थाईलैंड के चियांग माई प्रांत में स्थित स्थानीय संस्थानों से खरीदा गया था।
वयस्क बायोएसे में परीक्षण जीवों के रूप में उपयोग किए गए मच्छर स्वतंत्र रूप से संभोग करने वाले प्रयोगशाला एडीज मच्छर थे, जिनमें संवेदनशील मुआंग चियांग माई स्ट्रेन (MCM-S) और प्रतिरोधी पांग माई डांग स्ट्रेन (PMD-R) शामिल थे। MCM-S स्ट्रेन थाईलैंड के चियांग माई प्रांत के मुआंग चियांग माई क्षेत्र से एकत्र किए गए स्थानीय नमूनों से प्राप्त किया गया था और 1995 से CMU स्कूल ऑफ मेडिसिन के परजीवी विज्ञान विभाग के कीट विज्ञान कक्ष में रखा गया है [39]। PMD-R स्ट्रेन, जो परमेथ्रिन के प्रति प्रतिरोधी पाया गया, मूल रूप से थाईलैंड के चियांग माई प्रांत के माए तांग जिले के बान पांग माई डांग से एकत्र किए गए फील्ड मच्छरों से अलग किया गया था और 1997 से उसी संस्थान में रखा गया है [40]। PMD-R स्ट्रेन को चयनात्मक दबाव के तहत उगाया गया था ताकि WHO डिटेक्शन किट का उपयोग करके कुछ संशोधनों के साथ 0.75% परमेथ्रिन के आंतरायिक संपर्क द्वारा प्रतिरोध स्तर को बनाए रखा जा सके [41]। एडीज के प्रत्येक स्ट्रेन को एडीस एजिप्टी मच्छरों को 25 ± 2 °C तापमान और 80 ± 10% सापेक्ष आर्द्रता तथा 14:10 घंटे के प्रकाश/अंधकार चक्र वाले रोगजनक-मुक्त प्रयोगशाला में अलग-अलग रखा गया। लगभग 200 लार्वा को नल के पानी से भरी प्लास्टिक की ट्रे (33 सेमी लंबी, 28 सेमी चौड़ी और 9 सेमी ऊंची) में 150-200 लार्वा प्रति ट्रे के घनत्व पर रखा गया और उन्हें दिन में दो बार रोगाणुरहित कुत्ते के बिस्कुट खिलाए गए। वयस्क मच्छरों को नम पिंजरों में रखा गया और उन्हें लगातार 10% जलीय सुक्रोज घोल और 10% मल्टीविटामिन सिरप घोल दिया गया। मादा मच्छर अंडे देने के लिए नियमित रूप से रक्त चूसती हैं। दो से पांच दिन पुरानी मादा मच्छर, जिन्हें रक्त नहीं पिलाया गया है, का उपयोग प्रायोगिक वयस्क जैविक परीक्षणों में लगातार किया जा सकता है।
वयस्क मादा एडीज मच्छरों (एजिप्टी, एमसीएम-एस और पीएमडी-आर) पर एसेंशियल ऑयल (EO) की खुराक-मृत्यु प्रतिक्रिया का बायोएसे परीक्षण किया गया। यह परीक्षण संवेदनशीलता परीक्षण के लिए विश्व स्वास्थ्य संगठन (WHO) के मानक प्रोटोकॉल [42] के अनुसार संशोधित एक सामयिक विधि का उपयोग करके किया गया। प्रत्येक पौधे से प्राप्त EO को उपयुक्त विलायक (जैसे इथेनॉल या एसीटोन) के साथ क्रमिक रूप से पतला करके 4-6 सांद्रता की एक क्रमिक श्रृंखला प्राप्त की गई। कार्बन डाइऑक्साइड (CO2) से बेहोश करने के बाद, मच्छरों का वजन अलग-अलग किया गया। प्रक्रिया के दौरान पुनः सक्रियण को रोकने के लिए, बेहोश मच्छरों को एक स्टीरियोमाइक्रोस्कोप के नीचे एक विशेष ठंडी प्लेट पर सूखे फिल्टर पेपर पर स्थिर रखा गया। प्रत्येक उपचार के लिए, हैमिल्टन हैंडहेल्ड माइक्रो डिस्पेंसर (700 सीरीज माइक्रोलिटर™, हैमिल्टन कंपनी, रेनो, नेवाडा, यूएसए) का उपयोग करके मादा के ऊपरी प्रोनोटम पर 0.1 μl EO घोल लगाया गया। प्रत्येक सांद्रता के साथ पच्चीस मादा मच्छरों का उपचार किया गया, जिसमें कम से कम 4 अलग-अलग सांद्रताओं के लिए मृत्यु दर 10% से 95% तक रही। विलायक से उपचारित मच्छरों को नियंत्रण समूह के रूप में रखा गया। परीक्षण नमूनों के संदूषण को रोकने के लिए, परीक्षण किए गए प्रत्येक एसेंशियल ऑयल (EO) के लिए फ़िल्टर पेपर को नए फ़िल्टर पेपर से बदलें। इन जैव परीक्षणों में प्रयुक्त खुराक को जीवित मादा मच्छर के शरीर के वजन के प्रति मिलीग्राम एसेंशियल ऑयल (EO) के माइक्रोग्राम में व्यक्त किया गया है। वयस्क पीबीओ की गतिविधि का आकलन भी एसेंशियल ऑयल के समान ही किया गया, जिसमें सहक्रियात्मक प्रयोगों में पीबीओ को सकारात्मक नियंत्रण के रूप में उपयोग किया गया। सभी समूहों के उपचारित मच्छरों को प्लास्टिक के कपों में रखा गया और उन्हें 10% सुक्रोज और 10% मल्टीविटामिन सिरप दिया गया। सभी जैव परीक्षण 25 ± 2 °C तापमान और 80 ± 10% सापेक्ष आर्द्रता पर किए गए और नियंत्रण समूह के साथ चार बार दोहराए गए। 24 घंटे की पालन अवधि के दौरान मृत्यु दर की जाँच की गई और यांत्रिक उत्तेजना के प्रति मच्छर की प्रतिक्रिया की कमी से इसकी पुष्टि की गई, और फिर चार दोहरावों के औसत के आधार पर इसे दर्ज किया गया। प्रत्येक परीक्षण नमूने के लिए अलग-अलग मच्छर समूहों का उपयोग करते हुए प्रायोगिक उपचारों को चार बार दोहराया गया। परिणामों का सारांश निकाला गया और मृत्यु दर प्रतिशत की गणना के लिए इसका उपयोग किया गया, जिसका उपयोग प्रोबिट विश्लेषण द्वारा 24 घंटे की घातक खुराक निर्धारित करने के लिए किया गया।
ईओ और परमेथ्रिन के सहक्रियात्मक विषनाशक प्रभाव का आकलन स्थानीय विषाक्तता परीक्षण प्रक्रिया [42] का उपयोग करके किया गया, जैसा कि पहले वर्णित है। वांछित सांद्रता पर परमेथ्रिन तैयार करने के लिए एसीटोन या इथेनॉल को विलायक के रूप में उपयोग करें, साथ ही ईओ और परमेथ्रिन का द्विआधारी मिश्रण (ईओ-परमेथ्रिन: एलडी25 सांद्रता पर ईओ के साथ मिश्रित परमेथ्रिन) भी तैयार करें। परीक्षण किट (परमेथ्रिन और ईओ-परमेथ्रिन) का मूल्यांकन एडीस एजिप्टी के एमसीएम-एस और पीएमडी-आर उपभेदों के विरुद्ध किया गया। 25 मादा मच्छरों में से प्रत्येक को वयस्क मच्छरों को मारने में इसकी प्रभावशीलता का परीक्षण करने के लिए परमेथ्रिन की चार खुराकें दी गईं, प्रत्येक उपचार को चार बार दोहराया गया। संभावित ईओ सहक्रियात्मक प्रभावों की पहचान करने के लिए, 25 मादा मच्छरों में से प्रत्येक को ईओ-परमेथ्रिन की 4 से 6 खुराकें दी गईं, प्रत्येक प्रयोग को चार बार दोहराया गया। पीबीओ-परमेथ्रिन उपचार (पीबीओ की एलडी25 सांद्रता के साथ मिश्रित परमेथ्रिन) को भी सकारात्मक नियंत्रण के रूप में उपयोग किया गया। इन जैव परीक्षणों में प्रयुक्त खुराक को जीवित मादा मच्छर के शरीर के वजन के प्रति मिलीग्राम परीक्षण नमूने के नैनोग्राम में व्यक्त किया जाता है। प्रत्येक मच्छर प्रजाति के लिए चार प्रायोगिक मूल्यांकन अलग-अलग पाले गए समूहों पर किए गए, और मृत्यु दर के आंकड़ों को एकत्रित करके 24 घंटे की घातक खुराक निर्धारित करने के लिए प्रोबिट का उपयोग करके विश्लेषण किया गया।
मृत्यु दर को एबॉट सूत्र [43] का उपयोग करके समायोजित किया गया था। समायोजित डेटा का विश्लेषण SPSS (संस्करण 19.0) कंप्यूटर सांख्यिकी प्रोग्राम का उपयोग करके प्रोबिट रिग्रेशन विश्लेषण द्वारा किया गया था। 25%, 50%, 90%, 95% और 99% (क्रमशः LD25, LD50, LD90, LD95 और LD99) के घातक मानों की गणना संबंधित 95% विश्वास अंतराल (95% CI) का उपयोग करके की गई थी। प्रत्येक जैविक परीक्षण के भीतर ची-स्क्वायर परीक्षण या मैन-व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग करके परीक्षण नमूनों के बीच महत्व और अंतर के मापन का मूल्यांकन किया गया था। परिणामों को P < 0.05 पर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना गया।< 0.05. प्रतिरोध गुणांक (आरआर) का अनुमान एलडी50 स्तर पर निम्नलिखित सूत्र [12] का उपयोग करके लगाया जाता है:
आरआर > 1 प्रतिरोध को इंगित करता है, और आरआर ≤ 1 संवेदनशीलता को इंगित करता है। प्रत्येक सिनर्जिस्ट उम्मीदवार के सिनर्जी अनुपात (एसआर) मान की गणना निम्नानुसार की जाती है [34, 35, 44]:
यह कारक परिणामों को तीन श्रेणियों में विभाजित करता है: 1±0.05 के एसआर मान को कोई स्पष्ट प्रभाव नहीं माना जाता है, >1.05 के एसआर मान को सहक्रियात्मक प्रभाव माना जाता है, और 1.05 से कम एसआर मान को सहक्रियात्मक प्रभाव माना जाता है। सी. रोटंडस और ए. गैलंगा के प्रकंदों और सी. वेरम की छाल के भाप आसवन द्वारा हल्के पीले रंग का तरल तेल प्राप्त किया जा सकता है। शुष्क भार पर परिकलित उपज क्रमशः 0.15%, 0.27% (वजन/वजन) और 0.54% (वजन/वजन) थी (तालिका 1)। सी. रोटंडस, ए. गैलंगा और सी. वेरम के तेलों की रासायनिक संरचना के जीसी-एमएस अध्ययन से क्रमशः 19, 17 और 21 यौगिकों की उपस्थिति का पता चला, जो सभी घटकों का क्रमशः 80.22, 86.75 और 97.24% थे (तालिका 2)। C. lucidum प्रकंद तेल के यौगिकों में मुख्य रूप से साइपेरोनेन (14.04%), उसके बाद कैरलीन (9.57%), α-कैप्सेलन (7.97%) और α-कैप्सेलन (7.53%) शामिल हैं। गलंगल प्रकंद तेल का मुख्य रासायनिक घटक β-बिसबोलीन (18.27%) है, उसके बाद α-बर्गामोटिन (16.28%), 1,8-सिनेओल (10.17%) और पाइपेरोनॉल (10.09%) हैं। जबकि C. verum छाल के तेल में सिनामाल्डिहाइड (64.66%) को मुख्य घटक के रूप में पहचाना गया, वहीं सिनामिक एसीटेट (6.61%), α-कोपेन (5.83%) और 3-फेनिलप्रोपिओनल्डिहाइड (4.09%) को गौण घटक माना गया। चित्र 2 में दर्शाए अनुसार, साइपरने, β-बिसबोलीन और सिनामाल्डिहाइड की रासायनिक संरचनाएं क्रमशः सी. रोटंडस, ए. गैलंगा और सी. वेरम के मुख्य यौगिक हैं।
तीन ओओ के परिणामों का आकलन एडीज मच्छरों के खिलाफ वयस्क गतिविधि के आधार पर किया गया था। तालिका 3 में एडीज एजिप्टी मच्छरों के खिलाफ सभी ईओ का घातक प्रभाव पाया गया। सभी ईओ विभिन्न प्रकारों और खुराकों पर एमसीएम-एस एडीज मच्छरों पर घातक प्रभाव डालते हैं। सबसे प्रभावी ईओ सी. वेरम है, जिसके बाद ए. गैलंगा और सी. रोटंडस हैं, जिनके एलडी50 मान क्रमशः 3.30, 7.97 और 10.05 μg/mg एमसीएम-एस मादाओं में हैं, जो 3.22 (U = 1), Z = -0.775, P = 0.667), 7.94 (U = 2, Z = 0, P = 1) और 9.57 (U = 0, Z = -1.549, P = 0.333) μg/mg पीएमडी-आर महिलाओं की तुलना में थोड़े अधिक हैं। इससे यह पता चलता है कि पीबीओ का पीएमडी-आर पर वयस्क प्रभाव एमएसएम-एस स्ट्रेन की तुलना में थोड़ा अधिक है, जिसमें LD50 मान क्रमशः 4.79 और 6.30 μg/mg मादा हैं (U = 0, Z = -2.021, P = 0.057)। यह गणना की जा सकती है कि सी. वेरम, ए. गैलंगा, सी. रोटंडस और पीबीओ के पीएमडी-आर के विरुद्ध LD50 मान एमसीएम-एस के विरुद्ध मानों की तुलना में क्रमशः लगभग 0.98, 0.99, 0.95 और 0.76 गुना कम हैं। इस प्रकार, यह इंगित करता है कि पीबीओ और ईओ के प्रति संवेदनशीलता दोनों एडीज स्ट्रेन के बीच अपेक्षाकृत समान है। हालांकि पीएमडी-आर एमसीएम-एस की तुलना में अधिक संवेदनशील था, एडीज एजिप्टी की संवेदनशीलता में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। इसके विपरीत, दोनों एडीज स्ट्रेन परमेथ्रिन के प्रति अपनी संवेदनशीलता में बहुत भिन्न थे (तालिका 4)। पीएमडी-आर ने परमेथ्रिन के प्रति उल्लेखनीय प्रतिरोध प्रदर्शित किया (महिलाओं में एलडी50 मान = 0.44 एनजी/एमजी), एमसीएम-एस (महिलाओं में एलडी50 मान = 0.44 एनजी/एमजी) की तुलना में इसका एलडी50 मान 3.70 था (यू = 0, जेड = -2.309, पी = 0.029)। हालांकि पीएमडी-आर, एमसीएम-एस की तुलना में परमेथ्रिन के प्रति काफी कम संवेदनशील है, लेकिन पीबीओ और सी. वेरम, ए. गैलंगा और सी. रोटंडस तेलों के प्रति इसकी संवेदनशीलता एमसीएम-एस से थोड़ी अधिक है।
ईओ-परमेथ्रिन संयोजन के वयस्क आबादी जैव परीक्षण में देखा गया कि परमेथ्रिन और ईओ (एलडी25) के द्विआधारी मिश्रणों ने या तो सहक्रियात्मक प्रभाव (एसआर मान > 1.05) दिखाया या कोई प्रभाव नहीं (एसआर मान = 1 ± 0.05)। प्रायोगिक एल्बिनो मच्छरों पर ईओ-परमेथ्रिन मिश्रण के जटिल वयस्क प्रभावों को तालिका 4 और चित्र 3 में दर्शाया गया है। एडीज एजिप्टी स्ट्रेन एमसीएम-एस और पीएमडी-आर के लिए सी. वेरम तेल मिलाने से एमसीएम-एस के विरुद्ध परमेथ्रिन का एलडी50 थोड़ा कम हो गया और पीएमडी-आर के विरुद्ध एलडी50 थोड़ा बढ़ गया, जो महिलाओं में 0.44–0.42 एनजी/एमजी और महिलाओं में 3.70 से 3.85 एनजी/एमजी तक था। इसके विपरीत, C. rotundus और A. galanga तेलों को मिलाने से MCM-S पर परमेथ्रिन का LD50 मान 0.44 से घटकर 0.07 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) और 0.11 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) ng/mg महिलाओं तक काफी कम हो गया। MCM-S के LD50 मानों के आधार पर, C. rotundus और A. galanga तेलों को मिलाने के बाद EO-परमेथ्रिन मिश्रण के SR मान क्रमशः 6.28 और 4.00 थे। तदनुसार, पीएमडी-आर के विरुद्ध परमेथ्रिन का एलडी50 मान 3.70 से घटकर 0.42 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) हो गया और सी. रोटंडस और ए. गैलंगा तेलों को मिलाने पर यह 0.003 (U = 0, Z = -2.337, P = 0.029) एनजी/एमजी मादा तक पहुँच गया। पीएमडी-आर के विरुद्ध सी. रोटंडस के साथ संयुक्त परमेथ्रिन का एसआर मान 8.81 था, जबकि गैलंगल-परमेथ्रिन मिश्रण का एसआर मान 1233.33 था। MCM-S की तुलना में, धनात्मक नियंत्रण PBO का LD50 मान मादाओं में 0.44 से घटकर 0.26 ng/mg और PMD-R में 3.70 ng/mg से घटकर 0.65 ng/mg (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) हो गया (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029)। MCM-S और PMD-R उपभेदों के लिए PBO-परमेथ्रिन मिश्रण के SR मान क्रमशः 1.69 और 5.69 थे। ये परिणाम दर्शाते हैं कि C. rotundus और A. galanga तेल तथा PBO, MCM-S और PMD-R उपभेदों के लिए C. verum तेल की तुलना में परमेथ्रिन विषाक्तता को अधिक हद तक बढ़ाते हैं।
एडीज मच्छरों की पाइरेथ्रॉइड-संवेदनशील (MCM-S) और प्रतिरोधी (PMD-R) प्रजातियों के विरुद्ध ईओ, पीबीओ, परमेथ्रिन (PE) और उनके संयोजनों की वयस्क सक्रियता (LD50)। एडीज एजिप्टी
[45]. कृषि और चिकित्सा महत्व के लगभग सभी आर्थ्रोपोड्स को नियंत्रित करने के लिए विश्व भर में सिंथेटिक पाइरेथ्रोइड्स का उपयोग किया जाता है। हालाँकि, सिंथेटिक कीटनाशकों के उपयोग के हानिकारक परिणामों, विशेष रूप से मच्छरों में प्रतिरोध के विकास और व्यापक प्रसार, साथ ही दीर्घकालिक स्वास्थ्य और पर्यावरण पर इसके प्रभाव के कारण, पारंपरिक सिंथेटिक कीटनाशकों के उपयोग को कम करने और विकल्पों को विकसित करने की तत्काल आवश्यकता है [35, 46, 47]। पर्यावरण और मानव स्वास्थ्य की रक्षा के अलावा, वानस्पतिक कीटनाशकों के लाभों में उच्च चयनात्मकता, वैश्विक उपलब्धता और उत्पादन और उपयोग में आसानी शामिल है, जो उन्हें मच्छर नियंत्रण के लिए अधिक आकर्षक बनाती है [32, 48, 49]। यह अध्ययन, जीसी-एमएस विश्लेषण के माध्यम से प्रभावी आवश्यक तेलों की रासायनिक विशेषताओं को स्पष्ट करने के अलावा, वयस्क आवश्यक तेलों की क्षमता और पाइरेथ्रोइड-संवेदनशील उपभेदों (एमसीएम-एस) और प्रतिरोधी उपभेदों (पीएमडी-आर) में सिंथेटिक परमेथ्रिन एजिप्टी की विषाक्तता को बढ़ाने की उनकी क्षमता का भी आकलन करता है।
जीसी-एमएस विश्लेषण से पता चला कि साइपरीन (14.04%), β-बिसबोलीन (18.27%) और सिनामाल्डिहाइड (64.66%) क्रमशः सी. रोटंडस, ए. गैलंगा और सी. वेरम तेलों के मुख्य घटक थे। इन रसायनों ने विविध जैविक गतिविधियाँ प्रदर्शित की हैं। आह्न एट अल. [50] ने बताया कि सी. रोटंडस के प्रकंद से पृथक किया गया 6-एसिटॉक्सीसाइपरीन एक एंटीट्यूमर यौगिक के रूप में कार्य करता है और डिम्बग्रंथि कैंसर कोशिकाओं में कैस्पेस-निर्भर एपोप्टोसिस को प्रेरित कर सकता है। लोबान के पेड़ के आवश्यक तेल से निकाला गया β-बिसबोलीन, इन विट्रो और इन विवो दोनों में मानव और माउस स्तन ट्यूमर कोशिकाओं के खिलाफ विशिष्ट साइटोटॉक्सिसिटी प्रदर्शित करता है [51]। सिनेमल्डिहाइड, प्राकृतिक अर्क से प्राप्त या प्रयोगशाला में संश्लेषित, में कीटनाशक, जीवाणुरोधी, एंटीफंगल, सूजनरोधी, इम्यूनोमॉड्यूलेटरी, कैंसररोधी और एंटीएंजियोजेनिक गतिविधियाँ होने की सूचना मिली है [52]।
खुराक पर निर्भर वयस्क गतिविधि बायोएसे के परिणामों ने परीक्षण किए गए एसेंशियल ऑयल्स (EOs) की अच्छी क्षमता को दर्शाया और दिखाया कि एडीज मच्छर की एमसीएम-एस और पीएमडी-आर किस्में एसेंशियल ऑयल और पीबीओ के प्रति समान रूप से संवेदनशील थीं। एसेंशियल ऑयल और परमेथ्रिन की प्रभावशीलता की तुलना से पता चला कि परमेथ्रिन का एलर्जीरोधी प्रभाव अधिक मजबूत है: एमसीएम-एस और पीएमडी-आर किस्मों के लिए मादा मच्छरों में एलडी50 मान क्रमशः 0.44 और 3.70 एनजी/मिलीग्राम हैं। इन निष्कर्षों का समर्थन कई अध्ययनों से होता है जो दर्शाते हैं कि प्राकृतिक रूप से पाए जाने वाले कीटनाशक, विशेष रूप से पौधों से प्राप्त उत्पाद, आमतौर पर सिंथेटिक पदार्थों की तुलना में कम प्रभावी होते हैं [31, 34, 35, 53, 54]। इसका कारण यह हो सकता है कि एसेंशियल ऑयल सक्रिय या निष्क्रिय तत्वों का एक जटिल संयोजन है, जबकि परमेथ्रिन एक शुद्ध एकल सक्रिय यौगिक है। हालाँकि, विभिन्न क्रियाविधियों वाले प्राकृतिक सक्रिय अवयवों की विविधता और जटिलता मेजबान आबादी में जैविक गतिविधि को बढ़ा सकती है या प्रतिरोध के विकास में बाधा डाल सकती है [55, 56, 57]। कई शोधकर्ताओं ने सी. वेरम, ए. गैलंगा और सी. रोटंडस और उनके घटकों जैसे β-बिसबोलीन, सिनामाल्डिहाइड और 1,8-सिनेओल की मच्छर-रोधी क्षमता की रिपोर्ट की है [22, 36, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64]। हालाँकि, साहित्य की समीक्षा से पता चला है कि एडीज मच्छरों के खिलाफ परमेथ्रिन या अन्य सिंथेटिक कीटनाशकों के साथ इसके सहक्रियात्मक प्रभाव की कोई पूर्व रिपोर्ट नहीं है। एडीज एजिप्टी।
इस अध्ययन में, एडीज़ एजिप्टी की दो प्रजातियों के बीच परमेथ्रिन संवेदनशीलता में महत्वपूर्ण अंतर देखा गया। एमसीएम-एस परमेथ्रिन के प्रति संवेदनशील है, जबकि पीएमडी-आर इसके प्रति काफी कम संवेदनशील है, जिसकी प्रतिरोध दर 8.41 है। एमसीएम-एस की संवेदनशीलता की तुलना में, पीएमडी-आर परमेथ्रिन के प्रति कम संवेदनशील है, लेकिन एसेंशियल ऑयल (EO) के प्रति अधिक संवेदनशील है, जो एसेंशियल ऑयल के साथ परमेथ्रिन के संयोजन द्वारा इसकी प्रभावशीलता बढ़ाने के उद्देश्य से आगे के अध्ययनों के लिए आधार प्रदान करता है। वयस्क एडीज़ पर प्रभावों के लिए एक सहक्रियात्मक संयोजन-आधारित जैव परीक्षण से पता चला कि एसेंशियल ऑयल और परमेथ्रिन के द्विआधारी मिश्रण ने वयस्क एडीज़ एजिप्टी की मृत्यु दर को कम या अधिक किया। सी. वेरम तेल के मिलाने से एमसीएम-एस के विरुद्ध परमेथ्रिन का LD50 थोड़ा कम हो गया, लेकिन पीएमडी-आर के विरुद्ध LD50 थोड़ा बढ़ गया, जिसके एसआर मान क्रमशः 1.05 और 0.96 थे। इससे पता चलता है कि एमसीएम-एस और पीएमडी-आर पर परीक्षण करने पर सी. वेरम तेल का परमेथ्रिन पर कोई सहक्रियात्मक या विरोधी प्रभाव नहीं होता है। इसके विपरीत, सी. रोटंडस और ए. गैलंगा तेलों ने एमसीएम-एस या पीएमडी-आर पर परमेथ्रिन के एलडी50 मानों को काफी कम करके एक महत्वपूर्ण सहक्रियात्मक प्रभाव दिखाया। जब परमेथ्रिन को सी. रोटंडस और ए. गैलंगा के एसेंशियल ऑयल के साथ मिलाया गया, तो एमसीएम-एस के लिए एसेंशियल ऑयल-परमेथ्रिन मिश्रण के एसेंशियल रिडक्शन मान क्रमशः 6.28 और 4.00 थे। इसके अतिरिक्त, जब सी. रोटंडस (एसेंशियल रिडक्शन = 8.81) या ए. गैलंगा (एसेंशियल रिडक्शन = 1233.33) के साथ संयोजन में पीएमडी-आर के विरुद्ध परमेथ्रिन का मूल्यांकन किया गया, तो एसेंशियल रिडक्शन मानों में उल्लेखनीय वृद्धि हुई। यह ध्यान देने योग्य है कि सी. रोटंडस और ए. गैलंगा दोनों ने पीएमडी-आर एडी. एजिप्टी के विरुद्ध परमेथ्रिन की विषाक्तता को काफी हद तक बढ़ाया। इसी प्रकार, PBO द्वारा परमेथ्रिन की विषाक्तता में वृद्धि पाई गई, जिसमें MCM-S और PMD-R उपभेदों के लिए SR मान क्रमशः 1.69 और 5.69 थे। चूंकि C. rotundus और A. galanga के SR मान सबसे अधिक थे, इसलिए इन्हें क्रमशः MCM-S और PMD-R पर परमेथ्रिन की विषाक्तता बढ़ाने में सबसे अच्छे सहक्रियात्मक कारक माना गया।
कई पूर्व अध्ययनों में विभिन्न मच्छर प्रजातियों के विरुद्ध सिंथेटिक कीटनाशकों और पादप अर्क के संयोजन के सहक्रियात्मक प्रभाव की सूचना दी गई है। कलायनासुंदरम और दास [65] द्वारा किए गए एनोफेल्स स्टीफेंसि के विरुद्ध लार्वानाशक जैव परीक्षण से पता चला कि फेंथियन, एक व्यापक-स्पेक्ट्रम ऑर्गेनोफॉस्फेट, क्लेओडेन्ड्रोन इनर्मे, पेडलियम म्यूरैक्स और पार्थेनियम हिस्टेरोफोरस से जुड़ा हुआ था। अर्क के बीच क्रमशः 1.31, 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 और 2.23 के सहक्रियात्मक प्रभाव (SF) के साथ महत्वपूर्ण सहक्रिया देखी गई। 15 मैंग्रोव प्रजातियों की लार्वानाशक जांच में, मैंग्रोव स्टिल्टेड जड़ों के पेट्रोलियम ईथर अर्क को क्यूलेक्स क्विनक्वेफैसिएटस के विरुद्ध सबसे प्रभावी पाया गया, जिसका LC50 मान 25.7 मिलीग्राम/लीटर था [66]। इस अर्क और वानस्पतिक कीटनाशक पाइरेथ्रम के सहक्रियात्मक प्रभाव से पाइरेथ्रम का C. quinquefasciatus लार्वा के विरुद्ध LC50 0.132 mg/L से घटकर 0.107 mg/L हो गया। इसके अतिरिक्त, इस अध्ययन में 1.23 की SF गणना का उपयोग किया गया। [34,35,44]। एनोफेलेस मच्छरों के विरुद्ध सोलानम सिट्रॉन जड़ के अर्क और कई सिंथेटिक कीटनाशकों (जैसे, फेंथियन, साइपरमेथ्रिन (एक सिंथेटिक पाइरेथ्रॉइड) और टिमेथफोस (एक ऑर्गेनोफॉस्फोरस लार्वानाशक)) की संयुक्त प्रभावशीलता का मूल्यांकन किया गया। [54] और C. quinquefasciatus [34]। साइपरमेथ्रिन और पीले फल पेट्रोलियम ईथर अर्क के संयुक्त उपयोग ने सभी अनुपातों में साइपरमेथ्रिन पर एक सहक्रियात्मक प्रभाव दिखाया। सबसे प्रभावी अनुपात 1:1 बाइनरी संयोजन था, जिसमें LC50 और SF मान क्रमशः 0.0054 ppm और 6.83 थे, जो An. Stephen West[54] के सापेक्ष थे। जबकि S. xanthocarpum और temephos का 1:1 बाइनरी मिश्रण प्रतिपक्षी (SF = 0.6406) था, S. xanthocarpum-fenthion संयोजन (1:1) ने C. quinquefasciatus के विरुद्ध 1.3125 के SF के साथ सहक्रियात्मक गतिविधि प्रदर्शित की [34]। टोंग और ब्लोमक्विस्ट [35] ने एडीज मच्छरों पर कार्बैरिल (एक व्यापक-स्पेक्ट्रम कार्बामेट) और परमेथ्रिन की विषाक्तता पर पौधे के एथिलीन ऑक्साइड के प्रभावों का अध्ययन किया। एडीज एजिप्टी। परिणामों से पता चला कि अगर, काली मिर्च, जुनिपर, हेलिक्रिसम, चंदन और तिल से प्राप्त एथिलीन ऑक्साइड ने एडीज मच्छरों के लार्वा पर कार्बैरिल की विषाक्तता को बढ़ा दिया। एडीज एजिप्टी लार्वा के लिए एस.आर. मान 1.0 से 7.0 तक भिन्न थे। इसके विपरीत, कोई भी एस.ओ. वयस्क एडीज मच्छरों के लिए विषाक्त नहीं था। इस स्तर पर, एडीज एजिप्टी और एस.ओ.-कार्बैरिल के संयोजन के लिए कोई सहक्रियात्मक प्रभाव दर्ज नहीं किया गया है। एडीज मच्छरों के विरुद्ध कार्बैरिल की विषाक्तता को बढ़ाने के लिए पी.बी.ओ. का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था। एडीज एजिप्टी लार्वा और वयस्कों के एस.आर. मान क्रमशः 4.9-9.5 और 2.3 हैं। केवल परमेथ्रिन और एस.ओ. या पी.बी.ओ. के द्विआधारी मिश्रणों का लार्वानाशक गतिविधि के लिए परीक्षण किया गया था। एस.ओ.-परमेथ्रिन मिश्रण का एडीज मच्छरों के विरुद्ध विरोधी प्रभाव था, जबकि पी.बी.ओ.-परमेथ्रिन मिश्रण का सहक्रियात्मक प्रभाव था। एडीस एजिप्टी के लार्वा। हालांकि, पीबीओ-परमेथ्रिन मिश्रणों के लिए खुराक प्रतिक्रिया प्रयोग और एसआर मूल्यांकन अभी तक नहीं किए गए हैं। मच्छर वाहकों के खिलाफ फाइटोसिंथेटिक संयोजनों के सहक्रियात्मक प्रभावों के संबंध में कुछ ही परिणाम प्राप्त हुए हैं, ये आंकड़े मौजूदा परिणामों का समर्थन करते हैं, जो न केवल लागू खुराक को कम करने के लिए, बल्कि कीटों को मारने के प्रभाव को बढ़ाने के लिए भी सहक्रियात्मक तत्वों को जोड़ने की संभावना खोलते हैं। इसके अतिरिक्त, इस अध्ययन के परिणामों ने पहली बार प्रदर्शित किया कि सी. रोटंडस और ए. गैलंगा तेल, परमेथ्रिन विषाक्तता के साथ संयुक्त होने पर, पीबीओ की तुलना में एडीस मच्छरों के पाइरेथ्रॉइड-संवेदनशील और पाइरेथ्रॉइड-प्रतिरोधी उपभेदों के खिलाफ सहक्रियात्मक रूप से काफी अधिक प्रभावकारिता प्रदर्शित करते हैं। एडीस एजिप्टी। हालांकि, सहक्रियात्मक विश्लेषण से अप्रत्याशित परिणाम सामने आए, जिसमें सी. वेरम तेल ने दोनों एडीस उपभेदों के खिलाफ सबसे अधिक वयस्क-विरोधी गतिविधि दिखाई। आश्चर्यजनक रूप से, एडीस एजिप्टी पर परमेथ्रिन का विषाक्त प्रभाव असंतोषजनक था। विषाक्त प्रभावों और सहक्रियात्मक प्रभावों में भिन्नता इन तेलों में मौजूद जैवसक्रिय घटकों के विभिन्न प्रकारों और स्तरों के संपर्क में आने के कारण हो सकती है।
दक्षता में सुधार लाने के प्रयासों के बावजूद, सहक्रियात्मक क्रियाविधियाँ अभी भी स्पष्ट नहीं हैं। विभिन्न प्रभावकारिता और सहक्रियात्मक क्षमता के संभावित कारणों में परीक्षण किए गए उत्पादों की रासायनिक संरचना में अंतर और प्रतिरोध की स्थिति और विकास से जुड़ी मच्छरों की संवेदनशीलता में अंतर शामिल हो सकते हैं। इस अध्ययन में परीक्षण किए गए प्रमुख और गौण एथिलीन ऑक्साइड घटकों में अंतर हैं, और इनमें से कुछ यौगिकों को विभिन्न कीटों और रोग वाहकों के विरुद्ध विकर्षक और विषैले प्रभाव दिखाने के लिए सिद्ध किया गया है [61,62,64,67,68]। हालाँकि, C. rotundus, A. galanga और C. verum तेलों में पाए जाने वाले मुख्य यौगिक, जैसे कि साइपर्न, β-बिसबोलीन और सिनामाल्डिहाइड, का इस शोध पत्र में क्रमशः एडीस एजिप्टी के विरुद्ध उनके वयस्क-रोधी और सहक्रियात्मक प्रभावों के लिए परीक्षण नहीं किया गया था। इसलिए, प्रत्येक आवश्यक तेल में मौजूद सक्रिय तत्वों को अलग करने और इस मच्छर वाहक के विरुद्ध उनकी कीटनाशक प्रभावकारिता और सहक्रियात्मक अंतःक्रियाओं को स्पष्ट करने के लिए भविष्य के अध्ययनों की आवश्यकता है। सामान्यतः, कीटनाशक गतिविधि विषों और कीट ऊतकों के बीच क्रिया और प्रतिक्रिया पर निर्भर करती है, जिसे तीन चरणों में सरलीकृत और विभाजित किया जा सकता है: कीट के शरीर की त्वचा और लक्ष्य अंग झिल्ली में प्रवेश, सक्रियण (= लक्ष्य के साथ अंतःक्रिया) और विषहरण। विषैले पदार्थ [57, 69]। इसलिए, विषैले पदार्थों के संयोजन की बढ़ी हुई प्रभावशीलता के परिणामस्वरूप कीटनाशक सहक्रिया के लिए इनमें से कम से कम एक श्रेणी की आवश्यकता होती है, जैसे कि बढ़ा हुआ प्रवेश, संचित यौगिकों का अधिक सक्रियण, या कीटनाशक सक्रिय घटक का कम विषहरण। उदाहरण के लिए, ऊर्जा सहनशीलता एक मोटी क्यूटिकल के माध्यम से क्यूटिकल प्रवेश में देरी करती है और जैव रासायनिक प्रतिरोध, जैसे कि कुछ प्रतिरोधी कीट उपभेदों में देखा गया कीटनाशक चयापचय [70, 71]। परमेथ्रिन की विषाक्तता को बढ़ाने में, विशेष रूप से पीएमडी-आर के विरुद्ध, एसेंशियल ऑयल्स की महत्वपूर्ण प्रभावशीलता, प्रतिरोध तंत्र के साथ अंतःक्रिया करके कीटनाशक प्रतिरोध की समस्या का समाधान इंगित कर सकती है [57, 69, 70, 71]। टोंग और ब्लोमक्विस्ट [35] ने ईओ और सिंथेटिक कीटनाशकों के बीच एक सहक्रियात्मक अंतःक्रिया का प्रदर्शन करके इस अध्ययन के परिणामों का समर्थन किया। एडीस एजिप्टी में, विषहरण एंजाइमों के खिलाफ निरोधात्मक गतिविधि के प्रमाण हैं, जिनमें साइटोक्रोम P450 मोनोऑक्सीजिनेस और कार्बोक्सीएस्टरेस शामिल हैं, जो पारंपरिक कीटनाशकों के प्रतिरोध के विकास से निकटता से जुड़े हैं। पीबीओ को न केवल साइटोक्रोम P450 मोनोऑक्सीजिनेस का चयापचय अवरोधक कहा जाता है, बल्कि यह कीटनाशकों के प्रवेश में भी सुधार करता है, जैसा कि सहक्रियात्मक अध्ययनों में सकारात्मक नियंत्रण के रूप में इसके उपयोग से प्रदर्शित होता है [35, 72]। दिलचस्प बात यह है कि 1,8-सिनेओल, जो गैलंगल तेल में पाए जाने वाले महत्वपूर्ण घटकों में से एक है, कीट प्रजातियों पर अपने विषाक्त प्रभावों के लिए जाना जाता है [22, 63, 73] और जैविक गतिविधि अनुसंधान के कई क्षेत्रों में सहक्रियात्मक प्रभाव होने की सूचना दी गई है [74]। . ,75,76,77]। इसके अतिरिक्त, करक्यूमिन [78], 5-फ्लोरौरासिल [79], मेफेनैमिक एसिड [80] और ज़िडोवुडिन [81] सहित विभिन्न दवाओं के साथ 1,8-सिनेओल का संयोजन भी पारगम्यता को बढ़ावा देने वाला प्रभाव दिखाता है। इन विट्रो में। इस प्रकार, सहक्रियात्मक कीटनाशक क्रिया में 1,8-सिनेओल की संभावित भूमिका न केवल एक सक्रिय घटक के रूप में है, बल्कि एक प्रवेश वर्धक के रूप में भी है। परमेथ्रिन के साथ अधिक सहक्रियाशीलता के कारण, विशेष रूप से पीएमडी-आर के विरुद्ध, इस अध्ययन में देखे गए गैलंगल तेल और ट्राइकोसैंथिस तेल के सहक्रियात्मक प्रभाव प्रतिरोध तंत्रों के साथ अंतःक्रियाओं के परिणामस्वरूप हो सकते हैं, अर्थात् क्लोरीन के प्रति बढ़ी हुई पारगम्यता। पाइरेथ्रॉइड्स संचित यौगिकों की सक्रियता को बढ़ाते हैं और साइटोक्रोम P450 मोनोऑक्सीजिनेस और कार्बोक्सीएस्टरेस जैसे विषहरण एंजाइमों को बाधित करते हैं। हालांकि, सहक्रियात्मक तंत्रों में ईओ और इसके पृथक यौगिकों (अकेले या संयोजन में) की विशिष्ट भूमिका को स्पष्ट करने के लिए इन पहलुओं पर आगे के अध्ययन की आवश्यकता है।
1977 में, थाईलैंड में प्रमुख मच्छर-संक्रमण आबादी में परमेथ्रिन प्रतिरोध के बढ़ते स्तर की सूचना मिली थी, और अगले दशकों में, परमेथ्रिन का उपयोग बड़े पैमाने पर अन्य पाइरेथ्रॉइड रसायनों, विशेष रूप से डेल्टामेथ्रिन द्वारा प्रतिस्थापित किए गए रसायनों द्वारा किया जाने लगा [82]। हालांकि, अत्यधिक और निरंतर उपयोग के कारण डेल्टामेथ्रिन और कीटनाशकों के अन्य वर्गों के प्रति मच्छर-संक्रमण प्रतिरोध पूरे देश में अत्यंत आम है [14, 17, 83, 84, 85, 86]। इस समस्या से निपटने के लिए, परमेथ्रिन जैसे उन कीटनाशकों को, जो पहले प्रभावी थे और स्तनधारियों के लिए कम विषैले थे, बारी-बारी से उपयोग करने या पुनः उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है। वर्तमान में, यद्यपि हाल के राष्ट्रीय सरकारी मच्छर नियंत्रण कार्यक्रमों में परमेथ्रिन का उपयोग कम किया गया है, फिर भी मच्छर आबादी में परमेथ्रिन प्रतिरोध पाया जा सकता है। यह मच्छरों के व्यावसायिक घरेलू कीट नियंत्रण उत्पादों के संपर्क में आने के कारण हो सकता है, जिनमें मुख्य रूप से परमेथ्रिन और अन्य पाइरेथ्रॉइड होते हैं [14, 17]। इस प्रकार, परमेथ्रिन के सफल पुन: उपयोग के लिए मच्छर-संक्रमण प्रतिरोध को कम करने की रणनीतियों का विकास और कार्यान्वयन आवश्यक है। हालांकि इस अध्ययन में परीक्षण किए गए किसी भी आवश्यक तेल की प्रभावशीलता परमेथ्रिन जितनी नहीं थी, लेकिन परमेथ्रिन के साथ मिलकर काम करने पर प्रभावशाली सहक्रियात्मक प्रभाव देखने को मिले। यह एक आशाजनक संकेत है कि प्रतिरोध तंत्र के साथ एसेंशियल ऑयल की परस्पर क्रिया के परिणामस्वरूप परमेथ्रिन और एसेंशियल ऑयल का संयोजन अकेले कीटनाशक या एसेंशियल ऑयल की तुलना में अधिक प्रभावी होता है, विशेष रूप से पीएमडी-आर एडीस एजिप्टी के विरुद्ध। वेक्टर नियंत्रण के लिए कम खुराक का उपयोग करने के बावजूद, प्रभावशीलता बढ़ाने में सहक्रियात्मक मिश्रणों के लाभ से प्रतिरोध प्रबंधन में सुधार और लागत में कमी आ सकती है [33, 87]। इन परिणामों से यह देखकर खुशी होती है कि ए. गैलंगा और सी. रोटंडस एसेंशियल ऑयल, एमसीएम-एस और पीएमडी-आर दोनों उपभेदों में परमेथ्रिन विषाक्तता को बढ़ाने में पीबीओ की तुलना में काफी अधिक प्रभावी थे और पारंपरिक एर्गोजेनिक एड्स के संभावित विकल्प हैं।
चयनित एसेंशियल ऑयल्स (EOs) ने पीएमडी-आर ए. एजिप्टी मच्छरों के खिलाफ वयस्क विषाक्तता बढ़ाने में महत्वपूर्ण सहक्रियात्मक प्रभाव दिखाया, विशेष रूप से गलांगाल तेल का एसआर मान 1233.33 तक है, जो दर्शाता है कि एसेंशियल ऑयल में परमेथ्रिन की प्रभावशीलता बढ़ाने में एक सहक्रियात्मक कारक के रूप में व्यापक क्षमता है। इससे एक नए सक्रिय प्राकृतिक उत्पाद के उपयोग को प्रोत्साहन मिल सकता है, जो मिलकर अत्यधिक प्रभावी मच्छर नियंत्रण उत्पादों के उपयोग को बढ़ा सकता है। यह मच्छरों की आबादी में मौजूदा प्रतिरोध समस्याओं को दूर करने के लिए पुराने या पारंपरिक कीटनाशकों में प्रभावी रूप से सुधार करने के लिए एक वैकल्पिक सहक्रियात्मक कारक के रूप में एथिलीन ऑक्साइड की क्षमता को भी उजागर करता है। मच्छर नियंत्रण कार्यक्रमों में आसानी से उपलब्ध पौधों का उपयोग न केवल आयातित और महंगी सामग्रियों पर निर्भरता को कम करता है, बल्कि सार्वजनिक स्वास्थ्य प्रणालियों को मजबूत करने के लिए स्थानीय प्रयासों को भी प्रोत्साहित करता है।
ये परिणाम एथिलीन ऑक्साइड और परमेथ्रिन के संयोजन से उत्पन्न महत्वपूर्ण सहक्रियात्मक प्रभाव को स्पष्ट रूप से दर्शाते हैं। ये परिणाम मच्छर नियंत्रण में एथिलीन ऑक्साइड की एक पादप सहक्रियात्मक क्षमता को उजागर करते हैं, जिससे मच्छरों के विरुद्ध परमेथ्रिन की प्रभावशीलता बढ़ती है, विशेष रूप से प्रतिरोधी आबादी में। भविष्य के विकास और अनुसंधान के लिए गैलंगल और अल्पिनिया तेलों और उनके पृथक यौगिकों के सहक्रियात्मक जैवविश्लेषण, मच्छरों की विभिन्न प्रजातियों और अवस्थाओं के विरुद्ध प्राकृतिक या कृत्रिम मूल के कीटनाशकों के संयोजन, और गैर-लक्षित जीवों के विरुद्ध विषाक्तता परीक्षण की आवश्यकता होगी। एथिलीन ऑक्साइड का एक व्यवहार्य वैकल्पिक सहक्रियात्मक के रूप में व्यावहारिक उपयोग संभव है।
विश्व स्वास्थ्य संगठन। डेंगू की रोकथाम और नियंत्रण के लिए वैश्विक रणनीति 2012-2020। जिनेवा: विश्व स्वास्थ्य संगठन, 2012।
वीवर एससी, कोस्टा एफ., गार्सिया-ब्लैंको एमए, को एआई, रिबेरो जीएस, साडे जी., एट अल। जीका वायरस: इतिहास, उद्भव, जीव विज्ञान और नियंत्रण की संभावनाएं। एंटीवायरल अनुसंधान. 2016;130:69-80।
विश्व स्वास्थ्य संगठन। डेंगू तथ्य पत्रक। 2016। http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/। देखी गई तिथि: 20 जनवरी, 2017
जन स्वास्थ्य विभाग। थाईलैंड में डेंगू बुखार और डेंगू रक्तस्रावी बुखार के मामलों की वर्तमान स्थिति। 2016। http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf। एक्सेस की तिथि: 6 जनवरी, 2017
ओई ईई, गोह सीटी, गैबलर डीजे। सिंगापुर में डेंगू की रोकथाम और वेक्टर नियंत्रण के 35 वर्ष। अचानक संक्रामक रोग। 2006;12:887–93।
मॉरिसन एसी, ज़िलिंस्की-गुटिएरेज़ ई, स्कॉट टीडब्ल्यू, रोज़ेनबर्ग आर. एडीस एजिप्टी वायरल वैक्टर को नियंत्रित करने के लिए चुनौतियों की पहचान करें और समाधान प्रस्तावित करें। पीएलओएस मेडिसिन। 2008;5:362–6.
रोग नियंत्रण एवं रोकथाम केंद्र। डेंगू बुखार, कीट विज्ञान एवं पारिस्थितिकी। 2016। http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/। देखी गई तिथि: 6 जनवरी, 2017
ओहिमैन ईआई, अंगाये टीकेएन, बेसी एसई मलेरिया वाहक एनोफेल्स गैम्बिया के खिलाफ जैट्रोपा कर्कास (यूफोर्बिएसी) की पत्तियों, छाल, तनों और जड़ों की लार्वानाशक गतिविधि की तुलना। एसजेडएचबीआर. 2014;3:29-32.
सोलेमानी-अहमदी एम, वतनदौस्त एच, ज़ारेह एम. दक्षिणपूर्वी ईरान में मलेरिया उन्मूलन कार्यक्रम के मलेरिया प्रभावित क्षेत्रों में एनोफेल्स लार्वा की आवास विशेषताएँ। एशिया पैसिफिक जे ट्रॉपिकल बायोमेड। 2014;4(सप्लीमेंट 1):एस73–80।
बेलिनी आर, ज़ेलर एच, वैन बोर्टेल डब्ल्यू। वेस्ट नील वायरस के प्रकोप के वेक्टर नियंत्रण, रोकथाम और नियंत्रण के दृष्टिकोणों की समीक्षा और यूरोप के सामने आने वाली चुनौतियाँ। परजीवी वेक्टर। 2014;7:323।
मुथुसामी आर., शिवकुमार एमएस. लाल इल्लियों (एम्सेक्टा एल्बिस्ट्रिगा वॉकर) में साइपरमेथ्रिन प्रतिरोध का चयन और आणविक तंत्र। कीटों का जैव रासायनिक शरीर क्रिया विज्ञान। 2014;117:54–61.
रामकुमार जी., शिवकुमार एमएस. क्यूलेक्स क्विनक्वेफैसिएटस में परमेथ्रिन प्रतिरोध और अन्य कीटनाशकों के प्रति क्रॉस-प्रतिरोध का प्रयोगशाला अध्ययन। पलास्टोर रिसर्च सेंटर। 2015;114:2553–60।
मत्सुनाका एस, हट्सन डीएच, मर्फी एसडी। कीटनाशक रसायन विज्ञान: मानव कल्याण और पर्यावरण, खंड 3: क्रियाविधि, चयापचय और विष विज्ञान। न्यूयॉर्क: पेरगामोन प्रेस, 1983।
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. थाईलैंड में मानव रोग वाहकों के कीटनाशक प्रतिरोध और व्यवहारिक बचाव की समीक्षा। परजीवी वाहक। 2013;6:280.
चारेनविरियाफाप टी, औम-आंग बी, रतनथम एस. थाईलैंड में मच्छर वाहकों के बीच कीटनाशक प्रतिरोध के वर्तमान पैटर्न। दक्षिण पूर्व एशिया जर्नल ऑफ ट्रॉपिकल मेडिसिन पब्लिक हेल्थ। 1999;30:184-94।
चारेनविरियाफाप टी, बैंग्स एमजे, रतनथम एस. थाईलैंड में मलेरिया की स्थिति। दक्षिणपूर्व एशिया जर्नल ऑफ ट्रॉपिकल मेडिसिन एंड पब्लिक हेल्थ। 2000;31:225–37.
प्लेर्नसब एस, सैंगमसुक जे, यानोला जे, लुमजुआन एन, थिप्पावंकोसोल पी, वाल्टन एस, सोमबून पी। थाईलैंड के चियांग माई में एडीज एजिप्टी मच्छरों में एफ1534सी और वी1016जी नॉकडाउन प्रतिरोध उत्परिवर्तन की सामयिक आवृत्ति और पाइरेथ्रोइड युक्त थर्मल फॉग स्प्रे की दक्षता पर उत्परिवर्तन का प्रभाव। एक्टाट्रोप। 2016;162:125–32।
वोंटास जे, किउलोस ई, पाव्लिडी एन, मोरू ई, डेला टोरे ए, रैनसन एच। मुख्य डेंगू वैक्टर एडीज अल्बोपिक्टस और एडीज एजिप्टी में कीटनाशक प्रतिरोध। कीटों का जैव रासायनिक शरीर विज्ञान। 2012;104:126-31.