सीडीसी बॉटल बायोएसे का उपयोग करके भारत में आंतों के लीशमैनियासिस के वाहक, फ्लेबोटोमस अर्जेंटिप्स की साइपरमेथ्रिन के प्रति संवेदनशीलता की निगरानी | कीट और वाहक

आंतरिक लीशमैनियासिस (VL), जिसे भारतीय उपमहाद्वीप में काला-अज़ार के नाम से जाना जाता है, एक परजीवी रोग है जो फ्लैजेलेटेड प्रोटोजोआ लीशमैनिया के कारण होता है और यदि इसका समय पर उपचार न किया जाए तो यह घातक हो सकता है। दक्षिण-पूर्व एशिया में VL का एकमात्र पुष्ट वाहक सैंडफ्लाई फ्लेबोटोमस अर्जेंटिप्स है, जहाँ इसे सिंथेटिक कीटनाशक, इनडोर रेसिडुअल स्प्रेइंग (IRS) द्वारा नियंत्रित किया जाता है। VL नियंत्रण कार्यक्रमों में DDT के उपयोग से सैंडफ्लाई में प्रतिरोधक क्षमता विकसित हो गई है, इसलिए DDT को कीटनाशक अल्फा-साइपरमेथ्रिन से बदल दिया गया है। हालांकि, अल्फा-साइपरमेथ्रिन DDT के समान ही कार्य करता है, इसलिए इस कीटनाशक के बार-बार संपर्क में आने से होने वाले तनाव में सैंडफ्लाई में प्रतिरोधक क्षमता का खतरा बढ़ जाता है। इस अध्ययन में, हमने CDC बॉटल बायोएसे का उपयोग करके जंगली मच्छरों और उनकी F1 संतति की संवेदनशीलता का आकलन किया।
हमने भारत के बिहार राज्य के मुजफ्फरपुर जिले के 10 गांवों से मच्छर एकत्र किए। इनमें से आठ गांवों में अभी भी उच्च क्षमता वाले कीटनाशकों का प्रयोग जारी था।साइपरमेथ्रिनघर के अंदर छिड़काव के लिए, एक गाँव ने उच्च क्षमता वाले साइपरमेथ्रिन का उपयोग बंद कर दिया, और एक गाँव ने कभी भी उच्च क्षमता वाले साइपरमेथ्रिन का उपयोग नहीं किया। एकत्रित मच्छरों को एक पूर्व-निर्धारित नैदानिक ​​खुराक (40 मिनट के लिए 3 माइक्रोग्राम/मिलीलीटर) के संपर्क में एक निश्चित समय के लिए रखा गया, और संपर्क के 24 घंटे बाद नॉकडाउन दर और मृत्यु दर दर्ज की गई।
जंगली मच्छरों की मृत्यु दर 91.19% से 99.47% तक रही, और उनकी पहली पीढ़ी की मृत्यु दर 91.70% से 98.89% तक रही। संक्रमण के चौबीस घंटे बाद, जंगली मच्छरों की मृत्यु दर 89.34% से 98.93% तक रही, और उनकी पहली पीढ़ी की मृत्यु दर 90.16% से 98.33% तक रही।
इस अध्ययन के परिणाम बताते हैं कि पी. आर्जेंटिप्स में प्रतिरोधक क्षमता विकसित हो सकती है, जो उन्मूलन हासिल होने के बाद नियंत्रण बनाए रखने के लिए निरंतर निगरानी और सतर्कता की आवश्यकता को दर्शाता है।
आंतरिक लीशमैनियासिस (VL), जिसे भारतीय उपमहाद्वीप में काला-अज़ार के नाम से जाना जाता है, एक परजीवी रोग है जो फ्लैजेलेटेड प्रोटोजोआ लीशमैनिया के कारण होता है और संक्रमित मादा सैंड फ्लाई (डिप्टेरा: मायर्मेकोफागा) के काटने से फैलता है। दक्षिण-पूर्व एशिया में VL का एकमात्र पुष्ट वाहक सैंड फ्लाई ही है। भारत VL उन्मूलन के लक्ष्य के करीब है। हालांकि, उन्मूलन के बाद संक्रमण दर को कम बनाए रखने के लिए, संभावित संचरण को रोकने के लिए वाहक आबादी को कम करना महत्वपूर्ण है।
दक्षिणपूर्व एशिया में मच्छरों का नियंत्रण सिंथेटिक कीटनाशकों के उपयोग से घर के अंदर अवशिष्ट छिड़काव (आईआरएस) के माध्यम से किया जाता है। सिल्वरलेग्स के गुप्त विश्राम व्यवहार के कारण यह घर के अंदर अवशिष्ट छिड़काव के माध्यम से कीटनाशक नियंत्रण के लिए एक उपयुक्त लक्ष्य है [1]। भारत में राष्ट्रीय मलेरिया नियंत्रण कार्यक्रम के तहत डाइक्लोरोडिफेनिलट्राइक्लोरोएथेन (डीडीटी) के घर के अंदर अवशिष्ट छिड़काव से मच्छर आबादी को नियंत्रित करने और वीएल के मामलों को काफी हद तक कम करने में महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा है [2]। वीएल के इस अनियोजित नियंत्रण ने भारतीय वीएल उन्मूलन कार्यक्रम को सिल्वरलेग्स नियंत्रण की प्राथमिक विधि के रूप में घर के अंदर अवशिष्ट छिड़काव को अपनाने के लिए प्रेरित किया। 2005 में, भारत, बांग्लादेश और नेपाल की सरकारों ने 2015 तक वीएल को समाप्त करने के लक्ष्य के साथ एक समझौता ज्ञापन पर हस्ताक्षर किए [3]। उन्मूलन प्रयासों, जिसमें वेक्टर नियंत्रण और मानव मामलों के त्वरित निदान और उपचार का संयोजन शामिल था, का उद्देश्य 2015 तक समेकन चरण में प्रवेश करना था, एक लक्ष्य जिसे बाद में 2017 और फिर 2020 तक संशोधित किया गया। [4] उपेक्षित उष्णकटिबंधीय रोगों को खत्म करने के लिए नए वैश्विक रोडमैप में 2030 तक वीएल का उन्मूलन शामिल है।[5]
भारत में बीसीवीडी के उन्मूलन के बाद के चरण में प्रवेश करते समय, यह सुनिश्चित करना अनिवार्य है कि बीटा-साइपरमेथ्रिन के प्रति महत्वपूर्ण प्रतिरोध विकसित न हो। प्रतिरोध का कारण यह है कि डीडीटी और साइपरमेथ्रिन दोनों की क्रियाविधि समान है, अर्थात्, वे वीजीएससी प्रोटीन को लक्षित करते हैं[21]। इस प्रकार, अत्यधिक शक्तिशाली साइपरमेथ्रिन के नियमित संपर्क से उत्पन्न तनाव के कारण सैंडफ्लाई में प्रतिरोध विकसित होने का जोखिम बढ़ सकता है। इसलिए, इस कीटनाशक के प्रति प्रतिरोधी सैंडफ्लाई की संभावित आबादी की निगरानी और पहचान करना अनिवार्य है। इस संदर्भ में, इस अध्ययन का उद्देश्य चौबे एट अल. [20] द्वारा निर्धारित नैदानिक ​​खुराक और जोखिम अवधि का उपयोग करके जंगली सैंडफ्लाई की संवेदनशीलता स्थिति की निगरानी करना था। चौबे एट अल. ने भारत के बिहार राज्य के मुजफ्फरपुर जिले के विभिन्न गांवों से पी. अर्जेंटिप्स का अध्ययन किया, जहां साइपरमेथ्रिन से उपचारित इनडोर स्प्रेइंग सिस्टम का लगातार उपयोग किया जाता था (निरंतर आईपीएस गांव)। सीडीसी बॉटल बायोएसे का उपयोग करके उन गांवों से जंगली पी. अर्जेंटिप्स की संवेदनशीलता स्थिति की तुलना की गई, जिन्होंने साइपरमेथ्रिन-उपचारित इनडोर स्प्रेइंग सिस्टम का उपयोग बंद कर दिया था (पूर्व आईपीएस गांव) और उन गांवों से जिन्होंने कभी भी साइपरमेथ्रिन-उपचारित इनडोर स्प्रेइंग सिस्टम का उपयोग नहीं किया था (गैर-आईपीएस गांव)।
इस अध्ययन के लिए दस गांवों का चयन किया गया (चित्र 1; तालिका 1), जिनमें से आठ गांवों में सिंथेटिक पाइरेथ्रॉइड (हाइपरमेथ्रिन; जिन्हें निरंतर हाइपरमेथ्रिन वाले गांव के रूप में नामित किया गया) का लगातार घर के अंदर छिड़काव किया जाता रहा था और पिछले 3 वर्षों में उनमें वीएल के मामले (कम से कम एक मामला) दर्ज किए गए थे। अध्ययन में शामिल शेष दो गांवों में से, एक गांव जिसमें बीटा-साइपरमेथ्रिन का घर के अंदर छिड़काव नहीं किया गया था (घर के अंदर छिड़काव न करने वाला गांव) को नियंत्रण गांव के रूप में चुना गया और दूसरा गांव जिसमें बीटा-साइपरमेथ्रिन का रुक-रुक कर घर के अंदर छिड़काव किया जाता था (रुक-रुक कर घर के अंदर छिड़काव करने वाला गांव/पूर्व में घर के अंदर छिड़काव करने वाला गांव) को भी नियंत्रण गांव के रूप में चुना गया। इन गांवों का चयन स्वास्थ्य विभाग और घर के अंदर छिड़काव टीम के समन्वय और मुजफ्फरपुर जिले में घर के अंदर छिड़काव सूक्ष्म कार्य योजना के सत्यापन के आधार पर किया गया था।
मुजफ्फरपुर जिले का भौगोलिक मानचित्र, जिसमें अध्ययन में शामिल गांवों (1-10) के स्थान दर्शाए गए हैं। अध्ययन स्थल: 1, मणिफुलकाहा; 2, रामदास मझौली; 3, मधुबनी; 4, आनंदपुर हारुनी; 5, पांडे; 6, हीरापुर; 7, माधोपुर हजारी; 8, हामिदपुर; 9, नूनफारा; 10, सिमारा। यह मानचित्र QGIS सॉफ्टवेयर (संस्करण 3.30.3) और ओपन असेसमेंट शेपफाइल का उपयोग करके तैयार किया गया था।
प्रयोग के लिए बोतलों को चौबे एट अल. [20] और डेनलिंगर एट अल. [22] की विधियों के अनुसार तैयार किया गया था। संक्षेप में, प्रयोग से एक दिन पहले 500 मिलीलीटर की कांच की बोतलें तैयार की गईं और बोतलों की भीतरी दीवार पर कीटनाशक (α-साइपरमेथ्रिन की नैदानिक ​​खुराक 3 माइक्रोग्राम/मिलीलीटर थी) का एसीटोन घोल (2.0 मिलीलीटर) बोतलों के तल, दीवारों और ढक्कन पर लगाकर लेपित किया गया। इसके बाद प्रत्येक बोतल को 30 मिनट के लिए एक यांत्रिक रोलर पर सुखाया गया। इस दौरान, एसीटोन को वाष्पित होने देने के लिए ढक्कन को धीरे-धीरे खोलें। 30 मिनट सूखने के बाद, ढक्कन हटा दें और बोतल को तब तक घुमाएं जब तक कि सारा एसीटोन वाष्पित न हो जाए। इसके बाद बोतलों को रात भर सूखने के लिए खुला छोड़ दिया गया। प्रत्येक दोहराव परीक्षण के लिए, एक बोतल, जिसे नियंत्रण के रूप में उपयोग किया गया था, पर 2.0 मिलीलीटर एसीटोन की परत चढ़ाई गई थी। डेनलिंगर एट अल. और विश्व स्वास्थ्य संगठन [ 22 , 23 ] द्वारा वर्णित प्रक्रिया के अनुसार उचित सफाई के बाद प्रयोगों के दौरान सभी बोतलों का पुन: उपयोग किया गया।
कीटनाशक तैयार करने के अगले दिन, 30-40 जंगली मच्छरों (भूखे मादा मच्छरों) को पिंजरों से निकालकर शीशियों में रखा गया और प्रत्येक शीशी में धीरे से फूँक मारकर डाला गया। प्रत्येक कीटनाशक लेपित बोतल के लिए लगभग समान संख्या में मक्खियों का उपयोग किया गया, जिसमें नियंत्रण समूह भी शामिल था। प्रत्येक गाँव में इस प्रक्रिया को कम से कम पाँच से छह बार दोहराया गया। कीटनाशक के संपर्क में 40 मिनट के बाद, गिरी हुई मक्खियों की संख्या दर्ज की गई। सभी मक्खियों को एक यांत्रिक एस्पिरेटर से पकड़ा गया, बारीक जाली से ढके हुए पिंट कार्डबोर्ड कंटेनरों में रखा गया और एक अलग इनक्यूबेटर में समान आर्द्रता और तापमान की स्थिति में, उसी भोजन स्रोत (30% चीनी के घोल में भिगोई हुई रुई) के साथ रखा गया जैसा कि अनुपचारित कॉलोनियों में था। कीटनाशक के संपर्क में आने के 24 घंटे बाद मृत्यु दर दर्ज की गई। प्रजाति की पहचान की पुष्टि के लिए सभी मच्छरों का विच्छेदन और परीक्षण किया गया। यही प्रक्रिया F1 संतान मक्खियों के साथ भी की गई। संपर्क में आने के 24 घंटे बाद गिरी हुई मक्खियों की संख्या और मृत्यु दर दर्ज की गई। यदि नियंत्रण बोतलों में मृत्यु दर < 5% थी, तो प्रतिकृतियों में मृत्यु दर में कोई सुधार नहीं किया गया। यदि नियंत्रण बोतल में मृत्यु दर ≥ 5% और ≤ 20% थी, तो उस प्रतिकृति की परीक्षण बोतलों में मृत्यु दर को एबॉट के सूत्र का उपयोग करके ठीक किया गया। यदि नियंत्रण समूह में मृत्यु दर 20% से अधिक हो गई, तो संपूर्ण परीक्षण समूह को हटा दिया गया [24, 25, 26]।
जंगली पकड़े गए पी. अर्जेंटिप्स मच्छरों की औसत मृत्यु दर। त्रुटि बार माध्य की मानक त्रुटियों को दर्शाते हैं। ग्राफ के साथ दो लाल क्षैतिज रेखाओं का प्रतिच्छेदन (क्रमशः 90% और 98% मृत्यु दर) उस मृत्यु दर सीमा को इंगित करता है जिसमें प्रतिरोध विकसित हो सकता है।[25]
जंगली पकड़े गए पी. अर्जेंटिप्स की एफ1 संतान की औसत मृत्यु दर। त्रुटि बार माध्य की मानक त्रुटियों को दर्शाते हैं। दो लाल क्षैतिज रेखाओं (क्रमशः 90% और 98% मृत्यु दर) द्वारा प्रतिच्छेदित वक्र मृत्यु दर की सीमा को दर्शाते हैं जिस पर प्रतिरोध विकसित हो सकता है[25]।
नियंत्रण/गैर-आईआरएस गांव (मनिफुलकाहा) में मच्छर कीटनाशकों के प्रति अत्यधिक संवेदनशील पाए गए। नॉकडाउन और एक्सपोजर के 24 घंटे बाद जंगली मच्छरों की औसत मृत्यु दर (±SE) क्रमशः 99.47 ± 0.52% और 98.93 ± 0.65% थी, और एफ1 संतानों की औसत मृत्यु दर क्रमशः 98.89 ± 1.11% और 98.33 ± 1.11% थी (तालिका 2, 3)।
इस अध्ययन के परिणामों से संकेत मिलता है कि जिन गांवों में पाइरेथ्रॉइड (एसपी) α-साइपरमेथ्रिन का नियमित रूप से उपयोग किया जाता था, वहां चांदी-पैर वाली रेत मक्खियां इस सिंथेटिक पाइरेथ्रॉइड के प्रति प्रतिरोधक क्षमता विकसित कर सकती हैं। इसके विपरीत, जिन गांवों में आईआरएस/नियंत्रण कार्यक्रम लागू नहीं था, वहां से एकत्रित चांदी-पैर वाली रेत मक्खियां अत्यधिक संवेदनशील पाई गईं। जंगली रेत मक्खियों की आबादी की संवेदनशीलता की निगरानी करना उपयोग किए जाने वाले कीटनाशकों की प्रभावशीलता की निगरानी के लिए महत्वपूर्ण है, क्योंकि यह जानकारी कीटनाशक प्रतिरोध के प्रबंधन में सहायक हो सकती है। बिहार के स्थानिक क्षेत्रों से रेत मक्खियों में डीडीटी प्रतिरोध का उच्च स्तर नियमित रूप से देखा गया है, जिसका कारण आईआरएस द्वारा इस कीटनाशक के उपयोग से उत्पन्न ऐतिहासिक चयन दबाव है [1]।
हमने पाया कि पी. अर्जेंटिप्स पाइरेथ्रोइड्स के प्रति अत्यधिक संवेदनशील है, और भारत, बांग्लादेश और नेपाल में किए गए क्षेत्रीय परीक्षणों से पता चला कि साइपरमेथ्रिन या डेल्टामेथ्रिन के साथ संयोजन में उपयोग किए जाने पर आईआरएस की कीटवैज्ञानिक प्रभावकारिता बहुत अधिक थी [19, 26, 27, 28, 29]। हाल ही में, रॉय एट अल. [18] ने बताया कि नेपाल में पी. अर्जेंटिप्स ने पाइरेथ्रोइड्स के प्रति प्रतिरोधक क्षमता विकसित कर ली है। हमारे क्षेत्रीय संवेदनशीलता अध्ययन से पता चला कि गैर-आईआरएस प्रभावित गांवों से एकत्रित सिल्वरलेग्ड सैंड फ्लाई अत्यधिक संवेदनशील थीं, लेकिन आंतरायिक/पूर्व आईआरएस और निरंतर आईआरएस वाले गांवों से एकत्रित मक्खियां (आनंदपुर-हारुनी की सैंड फ्लाई को छोड़कर, जिनमें 24 घंटे के एक्सपोजर के बाद 89.34% मृत्यु दर थी, मृत्यु दर 90% से 97% तक थी) अत्यधिक प्रभावी साइपरमेथ्रिन के प्रति प्रतिरोधी होने की संभावना थी [25]। इस प्रतिरोध के विकास का एक संभावित कारण इनडोर रूटीन स्प्रेइंग (आईआरएस) और केस-आधारित स्थानीय स्प्रेइंग कार्यक्रमों द्वारा डाला गया दबाव है, जो स्थानिक क्षेत्रों/ब्लॉकों/गांवों में काला-अजार के प्रकोपों ​​के प्रबंधन के लिए मानक प्रक्रियाएं हैं (प्रकोप जांच और प्रबंधन के लिए मानक संचालन प्रक्रिया [30])। इस अध्ययन के परिणाम अत्यधिक प्रभावी साइपरमेथ्रिन के खिलाफ चयनात्मक दबाव के विकास के प्रारंभिक संकेत प्रदान करते हैं। दुर्भाग्य से, सीडीसी बॉटल बायोएसे का उपयोग करके प्राप्त इस क्षेत्र के ऐतिहासिक संवेदनशीलता डेटा तुलना के लिए उपलब्ध नहीं हैं; पिछले सभी अध्ययनों में डब्ल्यूएचओ कीटनाशक-संक्रमित कागज का उपयोग करके पी. आर्जेंटिप्स की संवेदनशीलता की निगरानी की गई है। डब्ल्यूएचओ परीक्षण स्ट्रिप्स में कीटनाशकों की नैदानिक ​​खुराक मलेरिया वाहकों (एनोफेल्स गैम्बिया) के खिलाफ उपयोग के लिए कीटनाशकों की अनुशंसित पहचान सांद्रता है, और सैंडफ्लाई पर इन सांद्रता की परिचालन प्रयोज्यता स्पष्ट नहीं है क्योंकि सैंडफ्लाई मच्छरों की तुलना में कम बार उड़ती हैं, और बायोएसे में सब्सट्रेट के संपर्क में अधिक समय बिताती हैं [23]।
नेपाल के वीएल स्थानिक क्षेत्रों में 1992 से सिंथेटिक पाइरेथ्रोइड्स का उपयोग सैंडफ्लाई नियंत्रण के लिए एसपी अल्फा-साइपरमेथ्रिन और लैम्डा-साइहलोथ्रिन के साथ बारी-बारी से किया जा रहा है [31], और बांग्लादेश में भी 2012 से डेल्टामेथ्रिन का उपयोग किया जा रहा है [32]। उन क्षेत्रों में जहां सिंथेटिक पाइरेथ्रोइड्स का लंबे समय से उपयोग किया जा रहा है, सिल्वरलेग्ड सैंडफ्लाई की जंगली आबादी में फेनोटाइपिक प्रतिरोध का पता चला है [18, 33, 34]। भारतीय सैंडफ्लाई की जंगली आबादी में एक गैर-पर्यायवाची उत्परिवर्तन (L1014F) का पता चला है और इसे डीडीटी के प्रतिरोध से जोड़ा गया है, जो यह दर्शाता है कि पाइरेथ्रोइड प्रतिरोध आणविक स्तर पर उत्पन्न होता है, क्योंकि डीडीटी और पाइरेथ्रोइड (अल्फा-साइपरमेथ्रिन) दोनों कीट तंत्रिका तंत्र में एक ही जीन को लक्षित करते हैं [17, 34]। इसलिए, उन्मूलन और उन्मूलन के बाद की अवधि के दौरान साइपरमेथ्रिन संवेदनशीलता का व्यवस्थित मूल्यांकन और मच्छर प्रतिरोध की निगरानी करना आवश्यक है।
इस अध्ययन की एक संभावित सीमा यह है कि हमने संवेदनशीलता मापने के लिए सीडीसी वायल बायोएसे का उपयोग किया, जबकि सभी तुलनाओं में डब्ल्यूएचओ बायोएसे किट का उपयोग करके किए गए पिछले अध्ययनों के परिणामों का उपयोग किया गया। दोनों बायोएसे के परिणाम सीधे तुलनीय नहीं हो सकते क्योंकि सीडीसी वायल बायोएसे निदान अवधि के अंत में नॉकडाउन को मापता है, जबकि डब्ल्यूएचओ किट बायोएसे एक्सपोजर के 24 या 72 घंटे बाद मृत्यु दर को मापता है (बाद वाला धीमी गति से काम करने वाले यौगिकों के लिए) [35]। एक अन्य संभावित सीमा इस अध्ययन में आईआरएस गांवों की संख्या की तुलना में एक गैर-आईआरएस और एक गैर-आईआरएस/पूर्व आईआरएस गांव की संख्या है। हम यह नहीं मान सकते कि एक जिले के अलग-अलग गांवों में देखी गई मच्छर वेक्टर संवेदनशीलता का स्तर बिहार के अन्य गांवों और जिलों में संवेदनशीलता के स्तर का प्रतिनिधि है। जैसे ही भारत ल्यूकेमिया वायरस के उन्मूलन के बाद के चरण में प्रवेश करता है, प्रतिरोध के महत्वपूर्ण विकास को रोकना अनिवार्य है। विभिन्न जिलों, ब्लॉकों और भौगोलिक क्षेत्रों से सैंडफ्लाई आबादी में प्रतिरोध की त्वरित निगरानी आवश्यक है। इस अध्ययन में प्रस्तुत आंकड़े प्रारंभिक हैं और विश्व स्वास्थ्य संगठन [35] द्वारा प्रकाशित पहचान सांद्रता के साथ तुलना करके सत्यापित किए जाने चाहिए ताकि कम सैंडफ्लाई आबादी को बनाए रखने और ल्यूकेमिया वायरस उन्मूलन का समर्थन करने के लिए वेक्टर नियंत्रण कार्यक्रमों को संशोधित करने से पहले इन क्षेत्रों में पी. अर्जेंटिप्स की संवेदनशीलता स्थिति का अधिक विशिष्ट विचार प्राप्त किया जा सके।
ल्यूकोसिस वायरस के वाहक मच्छर पी. आर्जेंटाइप्स में अत्यधिक प्रभावी साइपरमेथ्रिन के प्रति प्रतिरोधक क्षमता के प्रारंभिक लक्षण दिखाई देने लग सकते हैं। पी. आर्जेंटाइप्स की जंगली आबादी में कीटनाशक प्रतिरोधक क्षमता की नियमित निगरानी, ​​वाहक नियंत्रण उपायों के महामारी विज्ञान संबंधी प्रभाव को बनाए रखने के लिए आवश्यक है। कीटनाशक प्रतिरोधक क्षमता को नियंत्रित करने और भारत में ल्यूकोसिस वायरस के उन्मूलन में सहयोग के लिए विभिन्न क्रियाविधियों वाले कीटनाशकों का बारी-बारी से उपयोग करना और/या नए कीटनाशकों का मूल्यांकन और पंजीकरण आवश्यक तथा अनुशंसित है।